两性霉素B为对该药物过敏以及有严重肝病患者的禁用药。
两性霉素B为肾功能损害者的慎用药。用药期间需要严密监测患者的尿常规、血常规、肝功能、肾功能、心电图、血钾等。如果出现了血肌酐或者尿素氮升高的情况，需要减少药量或暂停治疗。在使用两性霉素B前给予解热镇痛药和抗组胺药，可减少本品的不良反应。
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